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液相色譜的發(fā)展變化介紹

點(diǎn)擊次數(shù):2306 發(fā)布時(shí)間:2018-03-21
   液相色譜的發(fā)展變化介紹
  液相色譜色譜法按分離機(jī)制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法及分子排阻色譜法。
  1、液固色譜法
  使用固體吸附劑,被分離組分在色譜柱上分離原理是根據(jù)固定相對(duì)組分吸附力大小不同而分離。分離過(guò)程是一個(gè)吸附-解吸附的平衡過(guò)程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁,粒度5~10μm。適用于分離分子量200~1000的組分,大多數(shù)用于非離子型化合物,離子型化合物易產(chǎn)生拖尾。常用于分離同分異構(gòu)體。
  2、液相色譜法
  使用將特定的液態(tài)物質(zhì)涂于擔(dān)體表面,或化學(xué)鍵合于擔(dān)體表面而形成的固定相,分離原理是根據(jù)被分離的組分在流動(dòng)相和固定相中溶解度不同而分離。分離過(guò)程是一個(gè)分配平衡過(guò)程。涂布式固定相應(yīng)具有良好的惰性;流動(dòng)相必須預(yù)用固定相飽和,以減少固定相從擔(dān)體表面流失;溫度的變化和不同批號(hào)流動(dòng)相的區(qū)別常引起柱子的變化;另外在流動(dòng)相中存在的固定相也使樣品的分離和收集復(fù)雜化。由于涂布式固定相難避免固定液流失,現(xiàn)在已少采用?,F(xiàn)在多采用的是化學(xué)鍵合固定相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。
  液相色譜法的分離機(jī)理是基于混合物中各組分對(duì)兩相親和力的差別。根據(jù)固定相(柱子里裝的填料)的不同,液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。
  根據(jù)固定相的整體外觀(guān)形式,液相色譜法可以分為柱色譜法、紙色譜法及薄層色譜法。
  按樣品與固定相的作用力,可分為吸附色譜、分配色譜、親和色譜、疏水色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜等。
  在液相柱色譜系統(tǒng)中加上壓液流系統(tǒng),使流動(dòng)相在壓下快速流動(dòng),以提分離效果,因此出現(xiàn)了(又稱(chēng)壓)液相色譜(HPLC)法。
  液固色譜,其固定相是一些具有吸附活性的物質(zhì)如硅膠、氧化鋁、分子篩、聚酰胺等。
  液相色譜的發(fā)展,涉及鍵合相,基于被測(cè)物質(zhì)在固定相(含液體)和流動(dòng)相之間的相對(duì)溶解度的差異,通過(guò)溶質(zhì)在兩相之間進(jìn)行分配以實(shí)現(xiàn)分離。將固定液機(jī)械地涂漬在擔(dān)體上組成固定相?;瘜W(xué)鍵合固定相。這種固定相是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)把各種不同的有機(jī)基團(tuán)鍵合到硅膠(載體)表面的游離羥基上,代替機(jī)械涂漬的液體固定相。這不僅避免了液體固定相流失的困擾,還改善了固定相的功能,提了分離的選擇性,化學(xué)鍵合色譜適用于分離幾乎類(lèi)型的化合物。

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